±¹³» ¿¬±¸ÁøÀÌ DNA¸¦ Àß¶ó ±³Á¤ÇÏ´Â À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀÇ Á¤È®¼ºÀ» ³ôÀÏ ¼ö ÀÖ´Â ¹æ¹ýÀ» °³¹ßÇß´Ù. ÇâÈÄ À¯ÀüÀÚ°¡À§¸¦ ÀÌ¿ëÇÑ À¯ÀüÀÚ ¹× Áٱ⼼Æ÷ Ä¡·áÀÇ ºÎÀÛ¿ëÀ» ÁÙÀ̴µ¥ Å©°Ô ±â¿©ÇÒ °ÍÀ¸·Î ±â´ëµÈ´Ù.
À¯ÀüÀÚ°¡À§(engineered nuclease)´Â ƯÁ¤ ¿°±â¼¿À» ÀνÄÇØ Àý´ÜÇϰųª ±³Á¤Çϵµ·Ï °í¾ÈµÈ ÀΰøÁ¦ÇÑÈ¿¼Ò·Î À¯ÀüÀÚº¯ÀÌ À¯µµ ¶Ç´Â À¯ÀüÀÚ ¼ö¼±¿¡ »ç¿ëÇÑ´Ù.
¼¿ï´ëÇб³ ±èÁø¼ö ±³¼ö¿Í Á¶½Â¿ì, ±è¼ÒÁ¤ ÇлýÀÌ ÁÖµµÇÑ À̹ø ¿¬±¸´Â ¹Ì·¡Ã¢Á¶°úÇÐºÎ¿Í Çѱ¹¿¬±¸Àç´ÜÀÌ ÃßÁøÇÏ´Â ¸®´õ¿¬±¸ÀÚÁö¿ø»ç¾÷(âÀÇÀû¿¬±¸)ÀÇ Áö¿øÀ¸·Î ¼öÇàµÇ¾ú°í À¯Àüü ºÐ¾ß ±¹Á¦ÇмúÁö Áö³ð ¸®¼Ä¡(Genome Research) ¿Â¶óÀÎÆÇ 11¿ù 20ÀÏÀÚ¿¡ °ÔÀçµÆ´Ù. ( ³í¹®¸í : Analysis of off-target effects of CRISPR/Cas-derived RNA-endonucleases and nickases)
RNA À¯ÀüÀÚ°¡À§´Â À¯ÀüÀÚ¸¦ ±³Á¤Çϴµ¥ »ç¿ëµÉ ¼ö ÀÖÁö¸¸ ¿øÇÏ´Â DNA ¿°±â¼¿ ÀÌ¿Ü À¯»çÇÑ ¼¿¿¡¼µµ ÀÛ¿ëÇÑ´Ù´Â ¹®Á¦°¡ ÀÖ¾ú´Ù. ¿¬±¸ÆÀÀº À¯»ç DNA ¿°±â¼¿¿¡´Â ÀÛ¿ëÇÏÁö ¾Ê°í Ç¥Àû DNA ¿°±â¼¿¸¸À» ¼±ÅÃÀûÀ¸·Î Àß¶ó ±³Á¤ÇÏ´Â À¯ÀüÀÚ°¡À§ ±â¼úÀ» °³¹ßÇß´Ù. ÀǵµÇÏÁö ¾ÊÀº DNA ¿°±â¼¿À» ÀÚ¸£°Ô µÇ¸é ¼¼Æ÷µ¶¼ºÀ» ÀÏÀ¸Å°°Å³ª ¿øÇÏÁö ¾Ê´Â ¿°»öü º¯À̸¦ À¯¹ßÇÒ ¼ö ÀÖ¾î À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀÇ Á¤È®¼ºÀº À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀÇ ÀÓ»óÀû ÀÀ¿ëÀ» À§ÇÑ ÇٽɰúÁ¦·Î ²ÅÈù´Ù. ÀÌ ±â¼úÀº À¯ÀüÇÐ ¿¬±¸, À¯ÀüÀÚ ¹× Áٱ⼼Æ÷ Ä¡·áÁ¦ °³¹ß, À¯ÀüÀÚ ±³Á¤À» ÅëÇÑ °íºÎ°¡°¡Ä¡ ³óÃà»ê¹° Ç°Á¾ °³·® µî¿¡ ³Î¸® È°¿ëÇÒ ¼ö ÀÖ¾î °ü·Ã ¿¬±¸¿¡ È°±â¸¦ ºÒ¾î³ÖÀ» °ÍÀ¸·Î ±â´ëµÈ´Ù.
Á¤È®¼º Çâ»óÀÇ ÇÙ½ÉÀº °¡À̵å RNAÀÇ ±¸Á¶¿Í Àü´ÞÇüÅ¿¡ ÀÖ´Ù.
°¡À̵å RNA ¾Õ¿¡ µÎ°³ÀÇ ±¸¾Æ´Ñ* ¿°±â¸¦ Ãß°¡ÇÑ °æ¿ì Ç¥Àû ¿°±â¼¿¿¡ ´ëÇؼ´Â Àß ÀÛ¿ëÇϸ鼵µ À¯»ç¼¿¿¡´Â ÀÛ¿ëÇÏÁö ¸øÇÏ°Ô µÇ¾î Àý´ÜÀÇ Á¤È®¼ºÀ» ³ôÀÎ °ÍÀÌ´Ù. ÇÑÆí ¿¬±¸ÆÀÀº Á¦1¼¼´ë À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀΠ¡ũÇΰŴºÅ¬¸®¾ÆÁ¦(ZFN)¸¦ ºñ·Ô, Á¦2¼¼´ë Å»·»(TALEN), Á¦3¼¼´ë RNA À¯ÀüÀÚ°¡À§¸¦ °³¹ßÇѵ¥ À̾î RNA À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀÇ Á¤È®¼ºÀ» ³ôÀÎ °ÍÀ¸·Î ÁÖ¸ñ¹Þ°í ÀÖ´Ù. ±è ±³¼ö´Â ¡°À̹ø ¿¬±¸´Â RNA À¯ÀüÀÚ°¡À§ÀÇ Á¤È®µµ¸¦ ³ôÀÓÀ¸·Î½á ÀǵµÄ¡ ¾ÊÀº µ¹¿¬º¯À̸¦ ¸·°í À¯ÀüÀÚ¸¦ Á¤±³ÇÏ°Ô ±³Á¤ÇÒ ¼ö ÀÖ´Â ¹æ¹ýÀ» Á¦½ÃÇÏ¿´´Ù¡±°í ¿¬±¸ÀÇÀǸ¦ ¹àÇû´Ù.